細胞培養(yǎng)的注意事項

養(yǎng)好細胞注意點

（一）冷凍管應如何解凍 

取出冷凍管后，須立即放入37 ℃ 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管的爆裂。

（二）細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時，DMSO如何處理

在細胞解凍之后，可直接離心去除DMSO，用新鮮的培養(yǎng)基懸浮后直接放入含有 新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中進行細胞培養(yǎng)，如此可避免解凍后細胞生長受到DMSO影響。

（三）可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基

每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活，不應該馬上替換。

（四）可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的血清種類

 血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

（五）何謂 FBS，FCS，CS，HS

FBS （fetal bovine serum） 和 FCS （fetal calf serum） 是相同的意思，兩者都是指胎牛血清。CS （calf serum） 則是指小牛血清。HS （horseserum） 則是指馬血清。

（六）培養(yǎng)細胞時應使用 5% 或 10% CO₂

一般培養(yǎng)基中大都使用 HCO₃^-/CO₃^2-/H⁺ 作為 pH 的緩沖系統，而培養(yǎng)基中 NaHCO₃ 的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的 CO₂ 濃度。理論當培養(yǎng)基中 NaHCO₃ 含量為每公升 3.7 g 時，細胞培養(yǎng)時應使用 10% CO₂；當培養(yǎng)基中 NaHCO₃ 為每公升 1.5 g 時，則應使用 5% CO₂ 培養(yǎng)細胞。