免疫染色的前期樣品準(zhǔn)備

　　對于貼壁細(xì)胞：可以直接用多孔板，例如6孔板、24孔板等，培養(yǎng)細(xì)胞，然后到預(yù)定時間時進(jìn)行固定等后續(xù)操作。也可以用潔凈的蓋玻片，70%乙醇中浸泡后，用無菌的鑷子放置到6孔板內(nèi)，然后用無菌的生理鹽水、PBS或培養(yǎng)液洗去殘留的乙醇。這時就可以種入細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞貼在蓋玻片上生長良好后，即可進(jìn)行固定等后續(xù)操作。 

　　對于懸浮細(xì)胞：把細(xì)胞先在固定液中固定，然后把細(xì)胞滴加在載玻片上，干燥后細(xì)胞會緊貼在載玻片上。然后就可以進(jìn)行后續(xù)操作。如果細(xì)胞的粘附能力不佳，可以在載玻片上用PDL等物質(zhì)進(jìn)行處理，以增強(qiáng)載玻片的粘附能力。  

　　對于冷凍切片：切片放置在載玻片上后，可以直接進(jìn)行固定等后續(xù)操作。

　　對于石蠟切片：脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟5分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟3次。無水乙醇5分鐘，兩次。90%乙醇5分鐘，兩 次，70％乙醇5分鐘，一次。蒸餾水5分鐘，兩次。
　　抗原修復(fù)：根據(jù)不同的抗原和抗體，可以選擇把切片放置在如下抗原修復(fù)液中，10mM檸檬酸鈉，pH6.0，或1mM EDTA，pH8.0，或10mM Tris, pH10.0，95℃加熱12分鐘，大約在30分鐘內(nèi)緩慢冷卻至室溫。