血漿游離血紅蛋白測(cè)定

　　實(shí)驗(yàn)原理

　　血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無色最終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，可測(cè)出其含量。

　　實(shí)驗(yàn)方法

　　材料：

　　1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

　　2.1%H2O2

　　3.10%醋酸溶液

　　4.分光光度計(jì)

　　方法：

　　1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。

　　2.按下表進(jìn)行操作，用分光光度計(jì)，波長(zhǎng)為530nm，以空白管調(diào)零，測(cè)定測(cè)定管的吸光度。

　　試劑 (ml)測(cè)定管空白管

　　2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液0.50.5

　　患者血漿0.02/

　　1% H2O20.50.5

　　混勻后室溫放置10min

　　10%醋酸溶液5.05.0

　　室溫放置10min

　　3.計(jì)算公式

　　血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

　　參考范圍：0-40mg/L

　　注意事項(xiàng)

　　1.一切容器避免血紅蛋白污染;

　　2.采血要順利，器皿要干燥，檢測(cè)血漿要新鮮，及時(shí)分離，防止人為溶血;

　　3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測(cè)時(shí)要小心，廢液要妥善處理，以免污染;

　　4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準(zhǔn)確。