微量分光光度計選購指南

　　自從03年Nanodrop推出首款超微量分光光度計，立即受到全球各分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一致追捧和好評。僅需0.5-1ul的樣品體積，對于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)來說，不僅意味著大大減少檢測損耗的樣品，也因?yàn)闄z測光徑減小而減少了對高濃度樣品如核酸或蛋白進(jìn)行梯度稀釋的需求，實(shí)在太方便。

　　近期的超微量分光光度計市場可真是熱鬧，各大品牌如NanoDrop、BioTek、島津等，都爭相推出了最新力作。讓人欣喜的是，我們還看到了可與大品牌媲美的國產(chǎn)分光光度計，這說明國內(nèi)的儀器市場也在不斷地創(chuàng)新。因此，如何選擇一臺合適的微量分光光度計顯的尤為重要。

　　分光光度計作為實(shí)驗(yàn)室中最常用的儀器之一，從低端到高端，五花八門，大家在選擇時可能有些無所適從。而只有從實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際需要出發(fā)，才能挑選出最合適的儀器。

　　①你們實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)應(yīng)用有哪些?未來會增加或改變嗎?

　　②你需要測量的樣品體積范圍?如果它變化很大，你需要著重考慮分光光度計的樣品量和靈活性。

　　③你是否需要同時測量多個樣品?

　　④你需要什么樣的靈敏度?對于低濃度樣品，3-5 nm的帶寬比窄帶寬(1 nm)儀器的一致性更好。

　　⑤有多少人會共用這一臺分光光度計?如果多人共用，預(yù)設(shè)程序可能會比較方便。

　　有一些硬性指標(biāo)，在選購時不得不看。分光光度計的波長范圍是選購時要考慮的重要因素之一。在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，一臺覆蓋紫外光和可見光的分光光度計是不可缺少的。

　　分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量。對于定量分析而言，3-5nm比較合適。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實(shí)驗(yàn)需要，當(dāng)然，價格也更高。

　　在檢測器方面，CCD陣列更為普及。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍，不僅光利用率得到改善，信噪比也得以提高。另外，CCD 陣列系統(tǒng)采用模塊化處理，使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管(PMTs)等單點(diǎn)真空管檢測器。

　　樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿，動輒50 ul，對于珍貴樣品來說那可真是大出血。因此現(xiàn)在面向分子生物學(xué)的分光光度計都趨向于微量化了(揮發(fā)性樣品不宜)。近期推出的幾款分光光度計，都無需比色皿，將樣品滴在特殊的表面上即可測量，所需的樣品量在2 ul或以下。這種方法檢測范圍超寬，無需對樣品進(jìn)行稀釋。稀釋樣品不僅耽誤時間，在準(zhǔn)確性上也是大打折扣。